Salah satu instrumen yang paling penting dalam makmal mikrobiologi ialah sterilizer, dengan autoklaf (sterilizer stim tekanan tinggi) yang paling biasa digunakan. Menurut GB 4789.1-2016, peralatan makmal harus diperiksa secara teratur dan/atau ditentukur (dengan tag pemeriksaan), dikekalkan, dan diservis untuk memastikan prestasi dan keselamatan operasi yang tepat. Tetapi adakah autoklaf anda menjalani pemeriksaan sedemikian? Dan jika anda ingin melakukan pengesahan, bagaimanakah anda harus melakukannya? Hari ini, kami akan meringkaskan kaedah utama untuk mengesahkan keberkesanan pensterilan autoklaf.
Pengesahan keberkesanan pensterilan autoklaf secara amnya merangkumi kaedah seperti penunjuk kimia, termometer maksimum, tiub suhu buatan sendiri, dan penunjuk biologi. Walaupun kaedah ini berkongsi prinsip yang sama -terutamanya mengesahkan sama ada steriler mencapai suhu yang diperlukan semasa pensterilan -anda boleh memilih satu atau lebih berdasarkan keadaan khusus makmal anda.
1. Kaedah penunjuk kimia
Prinsip: Petunjuk kimia menjalani perubahan warna atau bentuk di bawah keadaan suhu dan masa tertentu. Perubahan ini digunakan untuk menentukan sama ada parameter pensterilan telah dipenuhi.
Item yang biasa digunakan di makmal adalah pita penunjuk autoklaf 3m, yang berubah warna selepas pensterilan. Pita ini dibuat dari bahan kimia termosensitif, pemaju warna, dan bahan cat, dicetak dalam corak jalur pada pita pelekat. Ia digunakan terus ke luar pakej pensterilan, dengan panjang minimum 5 cm. Tekan pita dengan ringan untuk memastikan lekatan dan pengedap yang baik. Selepas terdedah kepada 121 ° C selama 20 minit atau 130 ° C selama 4 minit, jalur putih pepenjuru pada pita harus menjadi hitam sepenuhnya. Jika perubahan warna tidak sekata atau tidak lengkap, pakej dianggap tidak disterilkan dengan betul.
2. Kaedah termometer maksimum
Prinsip: Kaedah ini menggunakan termometer merkuri yang tidak kembali ke suhu yang lebih rendah apabila dipanaskan, sama dengan termometer perubatan tradisional. Ia menunjukkan suhu maksimum yang dicapai semasa pensterilan.
Untuk pengesahan, letakkan termometer merkuri di dalam botol Erlenmeyer yang dipenuhi air. Semasa pensterilan, letakkan kelalang di bahagian atas dan bawah autoklaf. Selepas proses, periksa sama ada bacaan termometer sepadan dengan suhu yang diperlukan. Kaedah ini hanya boleh mengesahkan suhu dan tidak dapat mengesahkan sama ada keperluan masa pensterilan dipenuhi, jadi ia mewakili standard minimum untuk pengesahan autoklaf.
3. Kaedah tiub suhu buatan sendiri
Prinsip: Kaedah ini menggunakan bahan kimia tertentu yang mencairkan dan menyusun semula pada suhu tertentu, dengan bentuk kristal yang tersendiri selepas penyejukan. Bahan kimia ini dimeteraikan dalam tiub kaca kecil dan diletakkan di dalam autoklaf. Selepas pensterilan, bentuk kristal diperiksa untuk menentukan sama ada suhu yang betul dicapai.
Asid benzoik biasanya digunakan, dengan titik lebur 121-123 ° C, yang sejajar dengan suhu pensterilan standard Autoclave. Asid benzoik pepejal dimeteraikan dalam tiub kaca kecil dan diletakkan di dalam autoklaf. Selepas pensterilan, keadaan asid benzoik diperhatikan untuk mengesahkan jika suhu sasaran dicapai. Seperti kaedah termometer maksimum, pendekatan ini hanya mengesahkan suhu, bukan tempoh pensterilan.
4. Kaedah penunjuk biologi
Prinsip: Kaedah ini menggunakan spora bukan patogen Geobacillus stearothermophilus sebagai organisma penunjuk untuk menilai keberkesanan pensterilan terma. Spora ini sangat tahan haba, dengan rintangan yang serupa dengan spora clostridium botulinum patogenik, menjadikannya petunjuk yang sesuai untuk mengesahkan keberkesanan pensterilan.
Petunjuk biologi boleh didapati dalam tiga bentuk: penggantungan spora, jalur spora, dan tiub spora dan sederhana bersepadu. Ini biasanya diletakkan di lima lokasi dalam bekas pensterilan: bahagian depan, tengah, dan belakang lapisan bawah, serta titik tengah lapisan atas dan tengah. Selepas pensterilan, penunjuk disuntik ke dalam air-peptone ungu-glukosa Bromocresol dan diinkubasi pada 55-60 ° C selama 2-7 hari. Sekiranya medium tetap jelas dan tidak berubah warna, spora terbunuh, menunjukkan pensterilan yang baik. Jika medium menjadi kuning dan keruh, spora terselamat, menunjukkan prestasi pensterilan yang lemah. Kedua -dua penggantungan spora dan jalur spora mengikuti proses pengesahan yang sama.
Tiub penunjuk biologi komersil juga biasa digunakan di makmal. Mereka mengandungi spora geobacillus stearothermophilus dan ampul kaca yang dimeteraikan dengan medium pertumbuhan. Tiub diletakkan di seluruh bekas pensterilan. Selepas autoklaf, ampoule kaca dihancurkan untuk melepaskan medium, dan tiub diinkubasi pada 56 ° C, di samping kawalan positif. Jika pensterilan tidak mencukupi, spora yang masih hidup akan tumbuh dan menjadikan kuah kuning. Jika pensterilan berkesan, spora tidak diaktifkan, dan sup tetap ungu.
Kekerapan pengesahan
Pada masa ini, tidak ada standard kebangsaan yang ketat mengenai kekerapan pengesahan keberkesanan autoklaf. Makmal dijangka menetapkan jadual pengesahan mereka sendiri dan mematuhi ketat kepada mereka. Memandangkan kedua -dua kemudahan penggunaan dan kebolehpercayaan keputusan, kami mengesyorkan menggunakan pita penunjuk dalam kombinasi dengan tiub penunjuk biologi, kerana mereka menawarkan operasi mudah dan pengesahan komprehensif keberkesanan pensterilan.
Nota mengenai pensterilan (tidak diperlukan untuk beberapa autoklaf automatik sepenuhnya yang diimport)
Apabila menggunakan sterilter stim tekanan tinggi, adalah penting untuk mengusir semua udara sejuk di dalam ruang apabila stim dibebaskan. Hanya selepas semua udara sejuk dikeluarkan sekiranya injap ekzos ditutup. Sekiranya udara kekal, tolok tekanan mungkin menunjukkan tekanan yang betul, tetapi suhu sebenar di dalam ruang akan jatuh pendek. Lebih banyak udara dikekalkan, semakin besar percanggahan antara tekanan dan suhu, yang berpotensi mengakibatkan pensterilan yang tidak lengkap. (Ini sering diperhatikan semasa pensterilan media penapaian, di mana gelembung udara kekal dalam tiub panduan kecil -cuba meletihkan udara sejuk dengan lebih teliti.)