Pengesahan kesan pensterilan autoklaf

Salah satu instrumen makmal penting dalam makmal mikrobiologi adalah sterilizer, dengan autoklaf menjadi jenis yang paling biasa digunakan. Menurut GB 4789.1-2016, peralatan makmal harus diperiksa secara teratur dan/atau ditentukur (dengan pelabelan yang sesuai), dikekalkan, dan diservis untuk memastikan prestasi dan keselamatan operasi. Tetapi adakah sterilizer anda menjalani pemeriksaan yang sama? Sekiranya pengesahan itu diperlukan, bagaimanakah ia perlu dijalankan?

Hari ini, kami akan merumuskan aspek utama pengesahan keberkesanan pensterilan untuk autoklaf.

Kaedah umum untuk mengesahkan keberkesanan pensterilan autoklaf termasuk kaedah penunjuk kimia, kaedah termometer tetap, kaedah probe suhu buatan sendiri, dan kaedah penunjuk biologi. Prinsip -prinsip di sebalik kaedah ini adalah sama, terutamanya memberi tumpuan kepada mengesahkan sama ada suhu di dalam steriler mencapai tahap yang diperlukan semasa pensterilan. Bergantung kepada syarat -syarat tertentu makmal, satu atau pelbagai kaedah boleh dipilih untuk pengesahan.

1. Kaedah penunjuk kimia
Prinsip: Petunjuk kimia menjalani perubahan warna atau ubah bentuk apabila terdedah kepada suhu dan tempoh tertentu, yang membolehkan penilaian sama ada parameter pensterilan telah dipenuhi.

Penunjuk yang biasa digunakan di makmal adalah pita penunjuk autoklaf 3m, yang mengubah warna sebelum dan selepas pensterilan untuk menunjukkan keberkesanan. Pita ini dibuat dengan bahan kimia sensitif haba dan agen pembangunan warna yang dicetak dalam jalur pada pita pelekat khas. Pita itu hendaklah digunakan pada bahagian luar pakej, dengan panjang minimum 5 cm, dan ditekan dengan tegas untuk melekat dan pengedap yang lebih baik. Selepas pensterilan pada 121 ° C selama 20 minit atau 130 ° C selama 4 minit, jalur putih pepenjuru pada pita akan menjadi hitam sepenuhnya. Jika perubahan warna tidak sekata atau tidak lengkap, pakej mungkin tidak memenuhi syarat pensterilan.

2. Kaedah termometer tetap
Prinsip: Kaedah ini menggunakan termometer merkuri yang mengekalkan suhu tertinggi yang dicapai, sama dengan termometer klinikal tradisional. Ia membantu menentukan suhu maksimum yang dicapai di dalam autoklaf semasa pensterilan.

Untuk pengesahan, termometer merkuri diletakkan di dalam kelalang kerucut besar yang dipenuhi dengan air. Semasa pensterilan, kelalang diposisikan di kedua -dua bahagian atas dan bawah autoklaf. Selepas pensterilan, bacaan termometer diperiksa terhadap suhu yang diperlukan. Walau bagaimanapun, kaedah ini hanya mengesahkan suhu dan tidak mengesahkan sama ada tempoh pensterilan adalah mencukupi, menjadikannya standard yang paling asas untuk pengesahan autoklaf.

3. Kaedah siasatan suhu buatan sendiri
Prinsip: Kaedah ini memanfaatkan ciri -ciri pencairan dan penghabluran semula bahan kimia tertentu apabila terdedah kepada haba. Dengan menyegel bahan kimia ini di dalam tiub kaca kecil dan meletakkannya dalam autoklaf, pembentukan kristal selepas pensterilan dapat menunjukkan sama ada suhu yang diperlukan dicapai.

Reagen yang biasa digunakan ialah asid benzoik, yang mempunyai titik lebur 121-123 ° C, yang hampir sama dengan suhu pensterilan yang diperlukan. Semasa pensterilan, asid benzoik pepejal dimeteraikan dalam tiub kaca kecil dan diletakkan di dalam autoklaf. Selepas proses, struktur kristal asid benzoik diperiksa untuk menentukan sama ada suhu yang diperlukan dicapai.

Seperti kaedah termometer tetap, pendekatan ini hanya menunjukkan suhu dan tidak dapat mengesahkan sama ada tempoh pensterilan adalah mencukupi.

4. Kaedah penunjuk biologi
Prinsip: Kaedah ini menggunakan spora geobacillus stearothermophilus bukan patogen sebagai organisma penunjuk untuk menilai keberkesanan pensterilan haba. Spora ini sangat tahan terhadap haba dan mempunyai rintangan terma yang serupa dengan spora botulinum Clostridium, menjadikannya rujukan yang boleh dipercayai untuk menilai sama ada autoklaf memenuhi keperluan pensterilan.

Petunjuk biologi datang dalam tiga bentuk:

Penggantungan spora
Jalur spora
Jalur spora digabungkan dengan medium budaya (tiub penunjuk biologi)
Petunjuk biologi biasanya diletakkan di lima lokasi di dalam ruang pensterilan:

Tahap Rendah: Depan, Tengah, dan Kembali
Tahap Atas: Pusat
Selepas pensterilan, penunjuk disuntik ke dalam air peptone bromocresol ungu-glukosa dan diinkubasi pada 55-60 ° C selama 2-7 hari:

Sekiranya medium budaya tetap jelas dan tidak berubah warna, spora telah dibunuh, menunjukkan pensterilan yang berkesan.
Sekiranya medium berubah menjadi kuning dan keruh, spora telah terselamat, bermakna proses pensterilan tidak berkesan.
Kaedah pengesahan yang sama berlaku untuk kedua -dua penggantungan spora dan jalur spora.

Banyak makmal juga menggunakan tiub penunjuk biologi komersial, yang berfungsi sama dengan penggantungan dan jalur spora. Tiub ini mengandungi spora G. stearothermophilus bersama -sama dengan medium ampoule kaca medium. Selepas autoklaf, ampul kaca di dalam tiub dihancurkan untuk melepaskan medium budaya, dan tiub diinkubasi pada 56 ° C, dengan kawalan positif dimasukkan.

Jika pensterilan tidak berkesan, spora yang berdaya maju akan tumbuh, menjadikan kuah kuning.
Jika pensterilan berjaya, spora tidak diaktifkan, dan sup tetap ungu.
Kekerapan pengesahan autoklaf
Pada masa ini, tiada piawaian pengawalseliaan yang ketat yang menentukan berapa kerap autoklaf mesti disahkan. Walau bagaimanapun, makmal harus menetapkan jadual pengesahan mereka sendiri dan tegas mematuhinya.

Untuk kemudahan operasi dan pengesahan yang boleh dipercayai, pita penunjuk kimia dan tiub penunjuk biologi sangat disyorkan. Kaedah ini mesra pengguna dan memberikan penilaian komprehensif mengenai keberkesanan pensterilan.

Pertimbangan Utama untuk Autoclaving
(Beberapa autoklaf yang diimport sepenuhnya tidak memerlukan pembuangan manual)

Apabila menggunakan autoklaf, penting untuk mengeluarkan udara sejuk dari ruang semasa memperkenalkan stim. Ventilasi ekzos harus dibuka sehingga semua udara sejuk diusir, memastikan pengagihan suhu di dalamnya.

Jika mana -mana udara kekal di dalam ruang, tolok tekanan mungkin menunjukkan tekanan yang betul, tetapi suhu sebenar akan lebih rendah dari yang dijangkakan. Air yang lebih sisa, semakin besar percanggahan, yang membawa kepada pensterilan yang tidak lengkap.

(Bagi mereka yang menghadapi gelembung udara dalam tiub kecil apabila mensterilkan media berasaskan penapaian, cuba meningkatkan pemindahan udara untuk meningkatkan hasil.)